تصنيف الإنزيمات المساعدة التي يتم الخلط بينها

الإنزيمات المساعدة والعوامل المساعدة والمنشطات
وفقا لمتطلبات الظروف المثلى للتفاعلات المحفزة بالإنزيم، ينبغي إضافة كمية معينة من العوامل المساعدة إلى نظام مقايسة الإنزيم من حيث المبدأ. تشير العوامل المساعدة إلى المكونات غير البروتينية اللازمة لنشاط الإنزيم، بما في ذلك الإنزيمات المساعدة والعوامل المساعدة ومنشطات الأيونات المعدنية. تسمى العوامل المساعدة المرتبطة ارتباطًا وثيقًا بالإنزيمات العوامل المساعدة؛ تسمى البروتينات الإنزيمية التي لا تحتوي على عوامل مساعدة بالإنزيمات، والتي تفتقر إلى النشاط التحفيزي وتتطلب إضافة عوامل مساعدة كافية لتكوين الإنزيمات المتجانسة. بعد الحضانة مع العامل المساعد لفترة من الوقت، سوف يتعافى نشاط الإنزيم. ولذلك، غالبا ما يكون من الضروري احتضان العامل المساعد في العينة والكاشف مسبقًا. غالبًا ما تكون كمية القاعدة المساعدة المستخدمة صغيرة نسبيًا.
تسمى الإنزيمات المساعدة، التي ترتبط بشكل فضفاض ببروتينات الإنزيمات ويمكن فصلها بسهولة عن الإنزيمات من خلال غسيل الكلى وطرق أخرى، بالإنزيمات المساعدة. على الرغم من أن الإنزيمات المساعدة تختلف عن ركائز الإنزيمات، إلا أنها تعمل بشكل مشابه للركائز، حيث ترتبط بالإنزيمات وتفصلها وتدورها أثناء التفاعلات الأنزيمية. يمكن تحديد جرعة الإنزيم المساعد عن طريق معاملتها كركائز. على سبيل المثال، يتم حساب الإنزيمات المساعدة في هيدروجيناز اللاكتات وفقًا للمعادلة الحركية للركيزة المزدوجة.
الجوهر الكيميائي للمنشط هو أيون معدني، والذي يمكن أن يكون المركز النشط للإنزيم أو ينشط نشاطه من خلال آليات أخرى. كمنشطات، يكون للأيونات المعدنية تأثير أكثر تعقيدًا على حركية التفاعلات الأنزيمية. الأكثر شيوعًا هي أيونات المعادن ثنائية التكافؤ مثل Mg2+، Zn2+، Mn2+، Ca2+، Fe2+، إلخ. معظم أيونات المعادن الثقيلة هي عوامل تغيير طبيعة الإنزيمات. غالبًا ما تظهر الأيونات المعدنية عداءًا أو تثبيطًا متبادلًا. غالبًا ما يتم إضافة EDTA إلى أنظمة فحص الإنزيمات لخلب بعض الأيونات غير الأساسية. من الضروري الحصول على تركيز مناسب من أيونات المعادن، حيث أن الأيونات الزائدة غالبًا ما تمنع معدل تفاعلات الإنزيمات. نظرًا لحقيقة أن حركية المنشطات غالبًا ما تختلف عن حركية الإنزيمات، فإن هذا يمكن أن يفسر اختلاف نسب العينات إلى محاليل التفاعل، مما يؤدي إلى نتائج قياس نشاط الإنزيم غير متناسبة. تأثير التنشيط لـ N- أسيتيل سيستئين على الكرياتين كيناز مشابه. يتم تحديد جرعة المنشط بشكل عام من خلال التجارب المتكررة.